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黄曲霉B1快检方法
发布时间:2017-08-15   点击次数:484次

【产 品 简 介】 黄曲霉B1(Aflatoxin B1简写为AFB1)是目前已知的化学物质中致癌性zui强的一种。黄曲霉B1对人和若干动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。国家质检总局规定黄曲霉B1是大部分食品的必检项目之一。本品的检测灵敏度为5ng/ml(5ppb)。
【检 测 原 理】 本品采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术,通过单克隆抗体竞争结合AFB1-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB1的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1单克隆抗体。
【样 品 制 备】 1.谷物:任取5g以上有代表性样品并粉碎过20目筛,准确称取2.0g均匀粉碎试样于配套离心管中,再准确加入4ml纯净水和4.0ml乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡5min,4000rpm离心1min得上清液,将上清液用吸管移出2.0ml到蒸发皿或小玻璃杯中,用电吹风吹干上清液,再根据样品的种类按以下规定的稀释液量,用铝箔袋内配套吸管反复冲洗,彻底溶解杯底所有的固体,此溶解液为样品提取液即检测液。考虑不同样品对黄曲霉B1的zui高含量要求,请参考下表进行用稀释液溶解杯底固体:
谷物残留限量(ppb)
2.5
5
10
20
使用稀释液体积(ml)
0.4
0.8
1.6
3.2
2.饲料(以残留限量50ppb计算):任取5g以上有代表性样品并粉碎过20目筛,准确称取2.0g均匀粉碎试样于配套离心管中,再准确加入4ml纯净水和4.0ml乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡5min,4000rpm离心1min得上清液,将上清液用吸管移出0.5ml到蒸发皿或小玻璃杯中,用电吹风吹干上清液,再以2ml的稀释液量用铝箔袋内配套吸管反复冲洗,彻底溶解杯底所有的固体,此溶解液为样品提取液即检测液。如果残留限量是30ppb,则用1.2ml的稀释液溶解;如果残留限量是40ppb,则用1.6ml的稀释液溶解。
3.食用油:称2.0g油样于小烧杯中,用8ml正乙烷分次将试样转移至分液漏斗中,准确加入4ml纯净水充分振荡3min,吸去上层正乙烷层,再加入4ml的乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡5min,静置或3000rpm离心得上清液,将上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中,用电吹风吹干,再用稀释液溶解后为样品提取液。
4.酱油、醋、发酵酒:称取25.0g样品于小烧杯中,用5ml蒸馏水将试样转移到分液漏斗中,加入20ml三氯*烷,加塞轻轻振摇3min,静置分层。放出下层三氯*烷层,经盛有约5g预先用三氯*烷湿润的无水Na2SO4过滤器于蒸发皿中,zui后用少量三氯*烷洗涤过滤器,洗液并于蒸发皿中,用电吹风吹干。吹干冷却后,准确加入稀释液,将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
【检 测 步 骤】 1. 在进行检测前先完整阅读使用说明书,使用前将试纸卡和待检样本溶解恢复至室温;
2. 从原包装袋中取出试纸卡,打开后平放在桌面上,请在1小时内尽快使用;
3. 用吸管吸取待检样品溶液,滴加3滴于加样孔中,加样后开始计时;
4. 结果应在10min内读取,超过12min的时间判读无效。

【结 果 判 定】 1.阳性:位置C显示出红色线条,而位置 T不显色时,或者位置C显示出红色线条,位置 T显示颜色非常模糊时,判为阳性。阳性结果表明:AFB1含量超过样品允许量。
2.阴性:位置C显示出红色线条,位置 T同时显示出红色线条,且T线颜色接近C线或者深于C线时,判为阴性。阴性结果表明:AFB1含量低于样品允许量。
3.无效:位置C不显示出红色线条,而位置 T显示出红色线条,该试纸卡视为无效。建议使用新的试纸卡按本说明书要求重新测试。
【注 意 事 项】 1.请按照操作步骤进行测试,操作时请勿触摸试纸显示区。
2.如购买时发现过期,破损,污染,无效的产品,请到购买处进行更换。
3.本品为一次性产品,请勿重复使用。
4.如遇稀释液不足,请用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。
5.本品为筛选试剂,任何阳性结果请用其他方法做进一步确认。
6.有条件的实验室可以用AFB1标准品测试后作为判断参考。
【储藏条件与有效期】本品应保存在干燥阴凉处(4--30℃),有效期18个月。
【配 置 清 单】
【备 注】 本产品仅适用于疑似问题食品的初筛,检测结果不具有法律效力,不能作为执法依据。

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