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常规反相色谱柱安装及使用维护指南
发布时间:2019-05-05   点击次数:76次

新色谱柱开启和安装的推荐步骤:

1. 开启色谱柱的包装盒,查看色谱的测试报告;

2. 根据色谱柱身上箭头标明的流向先将色谱柱入口端连入系统,柱出口端先不要连接;

3。 0.1 mL/min 流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2 min内将流速升至0.5 mL/min;

4. 当溶剂均匀的从柱出口端流出,停流速,将色谱柱出口端接到系统检测器上;

5. 重启流速,然后在0.1 mL/min 流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱30 min,在10 min内将流速升至1.0 mL/min冲洗30 min。

6。 参考柱效测试报告中的方法,30 min内将流动相梯度转换到柱效测试的流动相条件,然后使用5-10倍柱体积的流动相平衡色谱柱,直至压力与基线稳定。

7. 测试柱效。如果柱效与出厂报告偏移过大,或峰形拖尾就需要进行故障排查或联系上海易创分析仪器亿信彩票网址。

 

反相色谱柱的清洗与再生:

1。 发现柱压升高,色谱峰出现严重拖尾、肩峰甚至峰分岔,或分离度降低,有可能是样品溶解度、色谱柱温度、碱性化合物干扰,也很有可能是色谱柱受污染,可以采取以下措施:

2. 如系统有连接在线过滤器或保护柱,首先排查在线过滤器与保护柱,可能需要更新。

3。 使用纯有机相低流速冲洗过夜。(如有使用缓冲盐,应使用不含缓冲液的流动相冲洗1h,然后再梯度过渡到纯有机相低流速冲洗过夜。)

4。 如有机相清洗不能解决问题,可采用如下方法进行色谱柱的清洗和再生。根据样品的性质以及你了解的污染物性质选择清洗方法,用20-30倍柱体积(4.6*250 mm分析色谱柱大约80-120 mL溶剂清洗,流动相温度升至30-50 oC,然后再重复步骤3的方法。

5. 氨基柱

 

反相色谱柱的保存:

1。 反相色谱柱应保存于纯有机相中(如乙腈或甲醇)。色谱柱使用于高温或极端pH条件下,或停用超过48小时,应当进行简单的清洗过程;

2。 清洗首先用不含缓冲盐的流动相冲洗20-30倍柱体积, 然后30 min内梯度过渡到纯有机相,再用纯有机相冲洗20-30倍柱体积;

3. 最后使用原配的柱堵头拧紧,确保堵头溶剂不会挥发。若是氨基柱则应该在步骤2中添加0.1%的氨水,有利于延长氨基柱的寿命;

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